
细胞转染是通过物理、化学或生物方法将外源DNA、RNA或蛋白质导入真核细胞的技术,广泛应用于基因功能研究、重组蛋白生产、基因治疗及疫苗开发等领域。
该技术分为瞬时转染(外源基因未整合基因组,表达持续数天)和稳定转染(基因整合或保留于游离质粒)。主要方法包括物理法(电穿孔法、显微注射)、化学法(脂质体转染、磷酸钙共沉淀)和生物法(病毒介导转染)。 病毒介导法效率高但制备复杂,脂质体转染因操作便捷成为实验室常用方法,电穿孔法适用于原代免疫细胞等难转染类型。优化条件需考虑细胞类型、培养密度及DNA纯度等因素。电转染技术通过脉冲电场形成膜孔隙递送分子。转染效率受质粒超螺旋结构、内毒素含量及试剂选择影响,瞬时转染多用于重组蛋白生产,稳定转染需抗生素筛选。
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